【導(dǎo)讀】由于半導(dǎo)體生物傳感器的低成本、迅速反應(yīng)、檢測(cè)準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn),對(duì)于此類(lèi)傳感器的研究和開(kāi)發(fā)進(jìn)行了大量投入。特別是基于場(chǎng)效應(yīng)晶體管 (FET) 的生物傳感器或生物場(chǎng)效應(yīng)管,它們被廣泛用于各種應(yīng)用:如生物研究,即時(shí)診斷,環(huán)境應(yīng)用,以及食品安全。
由于半導(dǎo)體生物傳感器的低成本、迅速反應(yīng)、檢測(cè)準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn),對(duì)于此類(lèi)傳感器的研究和開(kāi)發(fā)進(jìn)行了大量投入。特別是基于場(chǎng)效應(yīng)晶體管 (FET) 的生物傳感器或生物場(chǎng)效應(yīng)管,它們被廣泛用于各種應(yīng)用:如生物研究,即時(shí)診斷,環(huán)境應(yīng)用,以及食品安全。
生物場(chǎng)效應(yīng)管將生物響應(yīng)轉(zhuǎn)換為分析物,并將其轉(zhuǎn)換為可以使用直流I-V技術(shù)輕松測(cè)量的電信號(hào)。輸出特性 (Id-Vd)、傳輸特性 (Id-Vg) 和電流測(cè)量值相對(duì)于時(shí)間 (I-t) 可以與分析物的檢測(cè)和幅度相關(guān)。
根據(jù)設(shè)備上的終端數(shù)量,可以使用多個(gè)源測(cè)量單元(SMU) 輕松完成這些直流I-V測(cè)試。SMU是一種既可以輸出又可以測(cè)量電流和電壓的儀器,可以用來(lái)對(duì)FET的柵極和漏極施加電壓。如圖1所示,Keithley 4200A-SCS參數(shù)分析儀是多個(gè)SMU與交互式軟件相結(jié)合的集成系統(tǒng)。這種可配置的測(cè)試系統(tǒng)將這些測(cè)量簡(jiǎn)化為一個(gè)集成系統(tǒng),包括硬件、交互軟件、圖形和分析功能。
圖1. 4200A-SCS參數(shù)分析儀
本應(yīng)用指南描述了典型的生物場(chǎng)效應(yīng)管,及如何將SMU和被測(cè)器件進(jìn)行電氣連接,定義了常見(jiàn)的直流I-V測(cè)試和用于進(jìn)行測(cè)量的儀器,并解釋了測(cè)量注意事項(xiàng)以達(dá)到理想測(cè)量結(jié)果。
一、生物場(chǎng)效應(yīng)管/BioFET感器
生物晶體管傳感器包含一個(gè)晶體管和一個(gè)生物敏感層,用于檢測(cè)類(lèi)似于生物分子等生物成分。圖2顯示了一個(gè)簡(jiǎn)化的圖,說(shuō)明了生物晶體管傳感器是如何工作的。
圖2. 使用生物傳感器和直流I-V測(cè)量?jī)x器檢測(cè)和測(cè)量生物成分
使用生物傳感器,生物成分如葡萄糖、病毒、PH值或癌細(xì)胞等被傳感元件(如生物受體、傳感膜或碳納米材料)檢測(cè),這些傳感元件是生物傳感器的一部分。該裝置將對(duì)被分析物的生物反應(yīng)轉(zhuǎn)化為電信號(hào)。生物元件的檢測(cè)和濃度與流過(guò)晶體管的漏極電流有關(guān)。然后使用直流I-V測(cè)量?jī)x器測(cè)量FET的電信號(hào)。這些測(cè)量?jī)x器與測(cè)量傳統(tǒng)晶體管的測(cè)量?jī)x器是一樣的。
在這些設(shè)備上執(zhí)行的常見(jiàn)直流I-V測(cè)試包括傳輸特性、輸出特性、閾值電壓、開(kāi)路電位和設(shè)備的柵極漏電流。
二、MOSFET概述
許多生物晶體傳感器基于MOSFET或金屬氧化物半導(dǎo)體FET,這是一個(gè)帶有絕緣柵極的三端或四端FET。
圖3顯示了一個(gè)n溝道MOSFET或nMOS晶體管,具有四個(gè)端子:柵極、漏極、源極和體極(塊體)。源極和漏極觸點(diǎn)是大量摻雜n+的區(qū)域。襯底為低摻雜材料p-。柵極用一層很薄的氧化層(通常是SiO2)與通道絕緣。
圖3. MOSFET簡(jiǎn)化電路
當(dāng)電壓源連接到柵極和漏極端并施加偏置電壓Vg和Vd時(shí),在源極和漏極端之間形成導(dǎo)電通道。電流開(kāi)始從漏極流向源極。電流流動(dòng)的方向與帶負(fù)電的電子的運(yùn)動(dòng)方向相反。柵極電壓與載流子一起控制通道。
圖4. 使用SMU測(cè)試MOSFET的直流I-V特性
如圖4所示,電路中的兩個(gè)電源可以替換為SMU。SMU可以提供電壓和測(cè)量電流,以確定MOSFET的I-V特性。在本例中,一個(gè)SMU連接到柵極端子上,施加?xùn)艠O電壓并測(cè)量柵極泄漏電流。第二個(gè)SMU連接到漏極端,施加漏極電壓并測(cè)量由此產(chǎn)生的漏極電流。除了加載電壓和測(cè)量電流外,還可以遠(yuǎn)程控制SMU改變電壓源的極性,并設(shè)置合適的鉗位電流,以防止過(guò)大的電流損壞設(shè)備。
根據(jù)I-V測(cè)量需求,SMU也可以連接到MOSFET的Source和Bulk端。本示例中,Source端和Bulk端分別連接在SMU的LO終端上。當(dāng)使用多個(gè)SMU時(shí),SMU的時(shí)間必須同步,這在4200A-SCS參數(shù)分析儀內(nèi)會(huì)自動(dòng)完成。
三、BioFETs示例
在本節(jié)中,將提供常見(jiàn)生物場(chǎng)效應(yīng)管的示例以及如何與這些器件進(jìn)行電氣連接。這些例子包括背柵生物場(chǎng)效應(yīng)管、擴(kuò)展柵極FET和離子敏感型FET。
Back-Gated BioFET
在背柵生物場(chǎng)效應(yīng)管中,如圖5所示,電和化學(xué)絕緣材料將半導(dǎo)體層與導(dǎo)電通道分開(kāi)。當(dāng)生物受體暴露于特定的分析物或生物元素時(shí),F(xiàn)ET的I-V特性將受到影響。在這種情況下,漏極電流與生物因素有關(guān),如病原體或其他生物分析物。
圖5. 背柵BioFET
電路中的兩個(gè)SMU用于偏置和表征器件。一個(gè)SMU連接到柵極,第二個(gè)SMU連接到漏極。源端可以連接到4200A-SCS的接地單元,也可以連接到第三個(gè)SMU。
在這個(gè)例子中,SMU1提供柵極電壓,也可以用來(lái)測(cè)量柵極泄漏電流。有時(shí)使用電源來(lái)加載柵極電壓SMU的使用提供了一個(gè)優(yōu)勢(shì),因?yàn)樗€可以測(cè)量柵極泄漏電流,這有助于研究器件的I-V特性。柵極電壓用于控制通道寬度,并可用于增加對(duì)分析物的靈敏度,因此更容易測(cè)量漏極電流。SMU2連接到漏極端并施加漏極電壓(VD)并測(cè)量漏極電流(ID)。
擴(kuò)展柵FET(EGFET)
圖6顯示了一個(gè)擴(kuò)展柵FET,它包括一個(gè)傳感結(jié)構(gòu)和一個(gè)MOSFET。在這種生物場(chǎng)效應(yīng)管中,傳感結(jié)構(gòu)和MOSFET在物理上分為兩部分。由于MOSFET與傳感元件是分離的,因此可以使用市售的MOSFET作為傳感器。EGFET有一個(gè)與MOSFET柵極直接接觸的工作電極。工作電極在電解質(zhì)溶液中也有傳感膜,用于檢測(cè)分析物。
在這種配置中,SMU1連接到參考電極并輸出參考電壓(VREF)。該電壓用于控制FET的通道寬度。SMU2施加漏極電壓(VD)并測(cè)量漏極電流(ID)。與背柵FET一樣,由兩個(gè)SMU測(cè)量的MOSFET的轉(zhuǎn)移特性(ID vs. VREF)將根據(jù)分析物而變化。SMU也可以用來(lái)測(cè)量輸出特性(ID vs. VD)和器件的柵漏電流。EGFET的一些應(yīng)用包括檢測(cè)特定分子,如葡萄糖、pH值和離子種類(lèi)。
圖6. 擴(kuò)展柵FET
離子選擇FET(ISFET)
如圖7所示,離子選擇場(chǎng)效應(yīng)晶體管(ISFET)用于測(cè)量溶液中的離子濃度。離子濃度與流過(guò)晶體管的漏極電流有關(guān)。ISFET廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,如pH值監(jiān)測(cè)、葡萄糖測(cè)量和抗體檢測(cè)。
ISFET與EGFET一樣,由傳感結(jié)構(gòu)和MOSFET組成。與EGFET不同的是,傳感元件和FET在物理上不是分開(kāi)的,而是結(jié)合在一起的。ISFET具有與MOSFET相同的基本結(jié)構(gòu),包括柵極、漏極和源極。然而,傳統(tǒng)的MOSFET的金屬柵極被溶液中的參考電極和離子敏感膜所取代。這個(gè)例子展示了一個(gè)硅溝道,但該溝道也可以由石墨烯、硅納米線或碳納米管等其他材料制成。
圖7. ISFET
在本例中,參考電極連接到SMU1,施加電壓并測(cè)量柵極電流。柵極電壓在基準(zhǔn)電極和襯底之間施加,并在FET的漏極和源極之間形成反轉(zhuǎn)層。FET的漏極連接到SMU2,加漏極電壓并測(cè)量漏極電流。背部端接有需要時(shí)用于連接ISFET的襯底和GNDU的Force LO。當(dāng)電解質(zhì)溶液的離子濃度變化時(shí),F(xiàn)ET的漏極電流也隨之變化,并由SMU2測(cè)量。
四、直流I-V測(cè)量
本節(jié)描述了用于表征生物場(chǎng)效應(yīng)管的常見(jiàn)直流I-V測(cè)量,包括傳輸特性(Id-Vg)、輸出特性(Id-Vd)和漏電流與時(shí)間測(cè)量(Id-t)。
傳輸特性(Id-Vg)
生物場(chǎng)效應(yīng)管上最常見(jiàn)的電氣測(cè)量可能是傳輸特性,它繪制漏極電流與柵極電壓的關(guān)系。轉(zhuǎn)移特性通常與正在研究的病原體或其他生物因素的濃度有關(guān)。
在這個(gè)測(cè)試中,一個(gè)SMU掃描柵極電壓,第二個(gè)SMU在恒定漏極電壓下測(cè)量產(chǎn)生的漏極電流。圖8顯示了四條不同的曲線,代表了四種不同濃度的病原體。這些曲線是使用4200A-SCS參數(shù)分析儀生成的。
圖8. 轉(zhuǎn)移特性
Clarius軟件庫(kù)中附帶了一個(gè)FET傳輸特性的測(cè)試,以及一個(gè)對(duì)傳輸和輸出特性都進(jìn)行測(cè)試的項(xiàng)目。這些測(cè)試和項(xiàng)目可以通過(guò)在軟件的Select視圖中在Library的搜索欄中輸入biofet來(lái)找到。這個(gè)測(cè)試的Configure截圖如圖9所示。
圖9. 在Clarius軟件中配置測(cè)試視圖以測(cè)量生物晶體管的Id-Vg
輸出特性(Id-Vd)
另一種常見(jiàn)的測(cè)試是確定FET的輸出特性,即漏極電流與漏極電壓的相關(guān)函數(shù),如圖10所示。這些曲線是使用4200A-SCS參數(shù)分析儀中的兩個(gè)SMU生成的。在這種情況下,SMU1連接?xùn)艠O提供步進(jìn)電壓,而連接漏極的SMU2則掃描電壓并測(cè)量產(chǎn)生的電流。
為了測(cè)試FET的功能,多個(gè)柵極階躍可以生成一系列曲線,并顯示漏極電流對(duì)柵極電壓的依賴(lài)關(guān)系?;蛘?,柵極電壓可以保持恒定,但對(duì)生物組分進(jìn)行改變,以觀察不同組分或濃度如何影響漏極電流。
圖10. 輸出特性
漏極電流 vs. 時(shí)間(Id-t)
通過(guò)繪制漏極電流隨時(shí)間的函數(shù)圖,可以監(jiān)測(cè)生物晶體管傳感器的動(dòng)態(tài)響應(yīng),如圖11所示。漏極電流的大小會(huì)隨著分析物濃度的變化而變化。在這種應(yīng)用中,當(dāng)漏極電流被測(cè)量時(shí),柵極和漏極電壓偏置都保持恒定,因此只有分析物在變化。
圖11. 漏極電流與時(shí)間趨勢(shì)圖
五、測(cè)量?jī)?yōu)化
在本節(jié)中,將描述實(shí)現(xiàn)最佳測(cè)量的方法,包括進(jìn)行空白測(cè)試/空測(cè),以最大限度地減少噪聲讀數(shù),允許足夠的穩(wěn)定時(shí)間,以及規(guī)范使用以避免損壞設(shè)備。
運(yùn)行“空白”測(cè)試
一旦系統(tǒng)設(shè)置好,運(yùn)行“空白”或空測(cè)以確保一切設(shè)置和配置正確是一個(gè)好方法。這個(gè)測(cè)試將通過(guò)測(cè)量設(shè)備的I-V特性來(lái)建立一個(gè)基線電流,以確保它在沒(méi)有添加任何生物成分的情況下是正常工作的。在添加生物組件之前,可以根據(jù)需要對(duì)測(cè)試電路和設(shè)置進(jìn)行調(diào)整。根據(jù)設(shè)備的類(lèi)型不同,這個(gè)操作可能是可執(zhí)行的也可能是不可能的。
最小化噪聲讀數(shù)
噪聲可能是測(cè)量低電流時(shí)最常見(jiàn)的問(wèn)題之一。生物晶體管的漏極電流或柵漏電流可以在nA和pA范圍內(nèi)。噪聲可能由幾種原因引起,可能需要一些實(shí)驗(yàn)來(lái)確定其來(lái)源。
當(dāng)帶電物體接近被測(cè)電路時(shí),會(huì)產(chǎn)生靜電干擾。在高阻抗電路中,這種電荷不會(huì)迅速衰減,可能導(dǎo)致測(cè)量結(jié)果不穩(wěn)定。錯(cuò)誤的讀數(shù)可能是由于直流或交流靜電場(chǎng)造成的,因此靜電屏蔽將有助于最大限度地減少這些場(chǎng)對(duì)測(cè)試的影響。
靜電屏蔽可以只是一個(gè)簡(jiǎn)單的金屬盒,將測(cè)試電路封閉起來(lái)。探針臺(tái)通常包括一個(gè)靜電/EMI屏蔽或可選的暗盒。屏蔽應(yīng)連接到測(cè)量電路LO端,即SMU的Force LO端子。Force LO端子位于SMU三軸電纜的外屏蔽層或位于GNDU上。所有電纜都需要采用低噪聲設(shè)計(jì)并屏蔽。每個(gè)42XX-SMU配有兩根低噪聲三軸電纜。
另一種降噪方法是控制外部噪聲源。這些噪聲源是由馬達(dá)、電腦屏幕或?qū)嶒?yàn)室或試驗(yàn)臺(tái)內(nèi)或附近的其他電氣設(shè)備產(chǎn)生的干擾。它們可以通過(guò)屏蔽和過(guò)濾或通過(guò)去除或關(guān)閉噪聲源來(lái)控制。
綜上所述,為了最大限度地減少噪聲讀數(shù):
? 讓所有帶電物體,包括人、導(dǎo)體遠(yuǎn)離測(cè)試電路的敏感區(qū)域
? 避免在測(cè)試區(qū)域附近移動(dòng)和振動(dòng)
? 控制或消除外部噪聲源
? 增加測(cè)量的積分時(shí)間,可以在Clarius的測(cè)試設(shè)置窗口中使用自定義速度模式進(jìn)行調(diào)整
? 用導(dǎo)電外殼將被測(cè)設(shè)備屏蔽,并將外殼與測(cè)試電路公共端子(Force LO)連接,如圖12所示。屏蔽可以只是一個(gè)簡(jiǎn)單的金屬盒或網(wǎng)狀屏幕,將測(cè)試電路封閉起來(lái)。
圖12. 導(dǎo)電屏蔽殼連接到Force LO
限制電流
為了防止在進(jìn)行I-V表征時(shí)損壞設(shè)備,設(shè)置鉗位值以限制可以流過(guò)設(shè)備的電流量。這可以在Clarius軟件中通過(guò)將每個(gè)SMU的當(dāng)前鉗位值設(shè)置為安全水平來(lái)完成。這是一個(gè)可編程限制,以確保電流不超過(guò)用戶(hù)定義的水平。
提供足夠的穩(wěn)定時(shí)間
當(dāng)測(cè)量低電流(<1μA)時(shí),需要允許足夠的穩(wěn)定時(shí)間,以確保在施加或改變電流或電壓后測(cè)量的穩(wěn)定性,例如當(dāng)掃描柵極電壓和測(cè)量漏極電流時(shí)。影響電路穩(wěn)定時(shí)間的因素包括測(cè)試電路的分流電容和器件電阻。分流電容包括電纜、測(cè)試夾具、探頭和開(kāi)關(guān)矩陣。
測(cè)量電路的穩(wěn)定時(shí)間可以通過(guò)繪制電流與時(shí)間到階躍電壓的關(guān)系來(lái)確定。穩(wěn)定時(shí)間可以通過(guò)圖形直觀地確定。一旦確定了穩(wěn)定時(shí)間,該值可以用作Clarius軟件的測(cè)試設(shè)置窗口中的電壓掃描延遲時(shí)間。
六、結(jié)論
基于FET的生物傳感器由于其成本低、反應(yīng)快、檢測(cè)準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn),研究和開(kāi)發(fā)得到了加強(qiáng)。生物OFET將對(duì)分析物的生物響應(yīng)轉(zhuǎn)換成可以通過(guò)直流I-V儀器輕松測(cè)量的電信號(hào)。4200A-SCS參數(shù)分析儀中的SMU用于執(zhí)行生物場(chǎng)效應(yīng)管的I-V表征,使用適當(dāng)?shù)膬x器設(shè)置和應(yīng)用適當(dāng)?shù)臏y(cè)量技術(shù)可以達(dá)到理想測(cè)量結(jié)果。
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